肠悦™对肉鸡肠道菌群数量的影响返回列表
芽孢杆菌类微生物添加剂具有防治疾病, 促进生长的功效, 且无毒、无残留, 是一类好氧、可形成芽孢的革兰氏阳性菌, 是国际公认可在饲料中直接使用的微生物菌种。枯草芽孢杆菌在制剂中以内生孢子形式存在, 孢子进入动物肠道后, 在肠道上部能迅速复活并分泌活性很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶, 有助于植物性饲料中某些复杂的碳水化合物降解, 产生具有拮抗肠道致病菌的多类物质, 同时通过生物夺氧消耗肠道内的氧气造成厌氧环境, 从而有利于维持肠道生态平衡。本试验所选用的肠悦™是结合肉禽生理特点,依据“同源筛分”原则,从健康鸡肠道中定向选育出的枯草芽孢杆菌(CGMCC No.3756),配伍3种植物提取物,经代表国际先进水平的发酵工艺-合生发酵开发而成的新型益生菌类肠道调节剂。
本试验的目的是研究日粮中添加肠悦™20对肉鸡肠道菌群数量的影响,以便进一步研究肠悦™20对动物肠道微生态环境的调控机制。
1、材料与方法
1.1 试验动物与试验日粮
选用180只1日龄AA肉公鸡,随机分成3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。试验日粮为:1)基础日粮(对照组),2)基础日粮+0.05%肠悦™20,3)基础日粮+150mg/kg金霉素(15%)。基础日粮参照NRC(1994)家禽营养需要配制,见表1 。鸡只自由采食和饮水。
1.2 肠悦™20由北京都润科技有限公司提供,枯草芽孢杆菌含量为20亿cfu/g。
1.3 测定指标与方法
1.3.1 生产性能 在0 ,6 周龄时按每个重复进行称重;于6 周龄末时按重复结算饲料消耗量。以重复为单位分别计算各处理组肉鸡的平均日增重、平均日采食量和饲料转化率。每日定期观察试验鸡的健康状况 ,记录腹泻鸡数和死淘数 ,腹泻的标准为在泄殖腔口可见明显的干或稀湿粪便黏附。以重复为统计单位 ,分别计算各处理组试验鸡的腹泻率和死淘率。
1.3.2 肠道菌群数量 从6周龄各处理组中随机选取6只试鸡,肌肉注射戊巴比妥酸钠麻醉后,迅速解剖,截取盲肠末端2cm肠段,液氮保存至实验分析。将样品从液氮中取出,在超净操作台内进行10-4~10-9倍比稀释。本试验拟测定肉鸡盲肠内容物中大肠杆菌、沙门氏菌、总需氧菌和乳酸杆菌的数量。大肠杆菌、沙门氏菌和总需氧菌:将盲肠内容物的稀释液(每类细菌分设3个适宜梯度)各200μL分别接种于伊红美兰琼脂、SS琼脂和营养琼脂培养基平皿上(各稀释度分设3个重复),用灭菌曲玻棒小心摊匀,在37 ℃生化培养箱中有氧培养24h后菌落计数。乳酸杆菌:将盲肠内容物的稀释液(每类细菌分设3个适宜梯度)200μL接种于乳酸杆菌选择性培养(LBS)平皿上(各稀释度分设3个重复),用灭菌曲玻棒小心摊匀,将培养平皿置于自制厌氧罐中在37 ℃生化培养箱中培养48 h后进行菌落计数。
平皿培养后,选择最适宜的稀释梯度(以长30-300个菌落为宜),对4种微生物进行平板菌落计数,求其平均值并计算每克肠道内容物所含的细菌数(LgCFU/g)。
1.4 数据处理与分析 试验数据采用SPSS数据处理软件进行显著性检验。
2、结果与分析
2.1 由表2可知,肠悦™20可以显著(P<0.05)提高肉鸡生长全期的平均日增重,抗生素对肉鸡全期生长影响不显著。肠悦™20和抗生素均能显著(P<0.05)改善全期饲料转化率;各处理组间平均日采食量差异均不显著(P>0.05)。
鸡群腹泻率以肠悦20组最低,抗生素组次之,均明显优于对照组。各试验组死淘率均较低,且各处理间差异不显著。
2.2 由表3可知,肠悦™20能减少肉鸡盲肠中的总需氧菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量 ,增加乳酸杆菌的数量;而金霉素对肉鸡盲肠微生物中的总需氧菌、大肠杆菌、沙门氏菌和乳酸杆菌都具有显著的抑制作用。
3、讨论
肠道菌群存在于宿主动物的消化道中,受饲料和环境等因素的影响而发生变化。抗生素早在20世纪40 年代就开始用于调控畜禽消化道微生物区系,曾对饲料工业的发展起到重要推动作用。现在研究表明 ,抗生素不但在促生长机理方面不明确,而且在实际应用中还存在一系列以下问题,如残留、耐药性、二重感染和降低机体免疫力等,其应用受到了很大的限制。因此,研制安全性高的抗生素替代品已成为研究热点。在本研究中,肠悦™20对肉鸡盲肠微生物的影响与金霉素有较大的不同。肠悦™20能减少肉鸡盲肠中的总需氧菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量,增加乳酸杆菌的数量。据报道,芽孢杆菌可使胃肠道内有益菌如乳酸杆菌和链球菌的数量增加,这些细菌会产生大量的有机酸使肠道内 pH 下降,从而抑制胃肠道内病原菌的繁殖;而且有报道已从芽孢杆菌中分离出杆菌肽,这也可抑制病原菌的繁殖。
合生发酵技术即在益生菌发酵过程中,以常规发酵培养物质为基础,根据“合生”理论,通过添加特定的一种或多种植物提取物进行发酵,从而显著增强菌株活力,缩短菌株生长周期以达到提高菌体增殖速度的目的;其中的植物提取物部分被益生菌利用后转化为寡糖等物质,对动物具有免疫激活作用。
肠悦™20经过合生发酵技术,菌株具有特异性强、活力高、繁殖力快的特点,其作用效果优于抗生素。本试验表明由肠悦™20对肉鸡盲肠菌群的作用效果最佳。
表1 试验日粮组成及营养水平
日粮组成
|
日龄
|
|
0-21日龄
|
22-42日龄
|
|
玉米
|
53.72
|
59.88
|
豆粕
|
39
|
33.23
|
植物油
|
3.67
|
3.82
|
石粉
|
0.96
|
1.04
|
磷酸氢钙
|
1.78
|
1.28
|
食盐
|
0.3
|
0.3
|
赖氨酸盐酸
|
0.02
|
0.06
|
蛋氨酸
|
0.17
|
0.06
|
胆碱
|
0.2
|
0.15
|
禽用多维预
|
0.03
|
0.03
|
微量元素预
|
0.15
|
0.15
|
合计
|
100
|
100
|
营养水平
|
||
代谢能/MJ
|
12.55
|
13.15
|
粗蛋白/ %
|
21.5
|
19.2
|
钙/ %
|
1
|
0.9
|
有效磷/ %
|
0.45
|
0.35
|
赖氨酸/ %
|
1.1
|
1
|
蛋氨酸/ %
|
0.5
|
0.38
|
表2 肠悦™20对肉鸡生产性能的影响
项目(0-42日龄)
|
对照组
|
肠悦™20组
|
抗生素组
|
平均日增重,g
|
49.2±4.3a
|
52.1±4.0b
|
51.1±3.0ab
|
平均日采食量,g
|
94.5±10.1
|
98.1±10.4
|
96.6±9.6
|
饲料转化率
|
1.92±0.16b
|
1.88±0.11a
|
1.90±0.09a
|
腹泻率,%
|
18.48±2.90b
|
7.77±1.18b
|
8.69±1.16b
|
死淘率,%
|
4.17±6.30
|
1.41±3.30
|
2.96±3.60
|
表3 肠悦™20对肉鸡肠道菌群的影响
项目(0-42日龄)
|
对照组
|
肠悦™20组
|
抗生素组
|
总需氧菌
|
8.79±0.36a
|
7.86±0.51c
|
8.30±0.21b
|
大肠杆菌
|
8.43±0.28a
|
7.60±0.33b
|
7.62±0.31b
|
沙门氏菌
|
6.89±0.31a
|
5.56±0.22c
|
5.89±0.27b
|
乳酸杆菌
|
8.04±0.30b
|
9.42±0.28a
|
7.93±0.36b
|