近年来，随着水产养殖的高密度集约化发展，疾病的大规模暴发给水产养殖业带来了巨大损失。而当前普遍使用的抗生素具有降低动物免疫力，污染水质及药物残留等弊端，因此，寻求能够能够替代抗生素的绿色饲料添加剂是当前水产养殖业急需解决的问题。
　　微生物饲料添加剂是近十几年来发展起来的活菌制剂及其代谢产物和生物促进物质的制品。在水产养殖中，以活菌制剂枯草芽孢杆菌应用最为广泛。枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是革兰氏阳性菌，严格好氧，能产生多种抗菌物质，包括脂肽类、磷脂类、多烯类、氨基酸类和核酸类等多种化合物，它们具有抑制真菌、细菌、病毒和菌原体等作用。生命力极强，代谢旺盛，在水体中迅速繁殖，并能产生较强活性的酶类，促进水产动物的消化，具有促进水产动物生长，提高免疫力和抗病力的作用。
本试验选用淡水养殖主要经济鱼类之一的鲤鱼为试验对象，验证肠爽™20对鲤鱼生长性能及抗病力的影响。
　　2、材料和方法
　　2.1　试验饲料
　　试验采用单因子完全随机设计，基础饲料配方见表1，基础饲料配方中粗蛋白含量为32.8%，粗脂肪含量为4.65%。在基础饲料配方中分别添加4mg/kg的黄霉素和500mg/kg肠爽™20（枯草芽孢杆菌，含菌量超过20亿cfu/g，由北京都润科技有限公司提供）共配成三种试验饲料，以基础饲料配方为对照组，黄霉素组和肠爽™20组为试验组。试验共设3个处理，每个处理3个重复。
   饲料制作参照Lim等（1996）的方法。先将各原料粉碎，过60目筛，称重，混均。添加适量的水做成含有10%水分的硬颗粒饲料，室温保存至使用。
　　2.2　试验动物
　　挑选规格一致的健康鲤鱼450尾，平均尾重19.21g，放入9个网箱中。网箱大小为1.8m×1.4m×1.5m，置于面积为2000m²，常年水深1.5～2.0m的池塘中。每箱为一个重复,每个重复50尾鱼，试验前用生石灰对网箱进行常规消毒。
　　2.3　饲养管理
　　试验在河南某养殖场进行，正式试验进行前将鱼暂养1周，投喂基础饲料。正式实验于2008年8月1日开始，到9月9日结束，共40天。日投饵4次（9:30，12:30，14:30，17:30），每次40～60min，日投饵量为体重的2％～4％，视鱼的摄食情况、体增重及水温变化有适当调整。试验期死鱼及时捞出并称重。每天记录投食量和水温。试验期水温24.0～30.8℃，NH4-N为1.0～1.5mg/L^-1，溶氧>7mg/L，H₂S小于0.05mg/L。水体透明度1.5～2.0m，pH值为7.0～8.0。
　　2.4　细菌攻毒实验
　　嗜水气单胞菌是引发鱼类暴发性出血病的主要致病菌。养殖试验结束后，通过注射半致死浓度的嗜水气单胞菌进行鲤鱼攻毒试验，在攻毒后的14天内，记录各组的累计死亡率。
　　3、评价指标
　　相对增重率（％）＝平均增重(g)/平均初重×100
　　特定生长率（SGR）＝Ln(平均末重)-Ln(平均初重)/投食天数×100
　　饵料系数(FCR)＝摄食量（g）/增重量(g)
　　成活率（％）＝存活鱼数/放养尾数×100
　　4、数据统计和分析
　　采用Excel对所得数据进行处理，然后采用SPSS 11.5 for Windows进行单因素方差分析。
　　5、试验结果

表1 鲤鱼基础饲料配方

表2 肠爽™20对鲤鱼生长性能的影响

注：表中数据为平均值±标准误，同一列上标不同字母表示差异显著（P<0.05）

图1 鲤鱼细菌攻毒后14d内的累计死亡率

　　5.1　生长性能指标
　　增重率、特定生长率、饵料系数和成活率见表2。
　　由表2可知，肠爽™20组相对增重率、特定生长率、成活率显著高于对照组，饵料系数显著低于对照组（p<0.05），起到了替代抗生素的效果。其中，肠爽™20组和抗生素组的增重率比对照组分别提高21.65%和17.63%（p<0.05），特定生长率比对照组分别提高了13.52%和11.16%（p<0.05）；肠爽™20组饵料系数比对照组降低了8.61%（p<0.05）；成活率比对照组提高了10.6%（p<0.05）。
　　5.2　抗病力指标
　　攻毒实验：通过注射半致死浓度的嗜水气单胞菌对鲤鱼进行细菌攻毒实验表明，在攻毒后的14天内，对照组和黄霉素组的累计死亡率分别为78.77%和67.13%，而肠爽™20组的累计死亡率是30.45%，显著提高了鲤鱼的抗病力（p<0.05）。
　　6、讨论
　　6.1　肠爽™20对鲤鱼的促生长作用
  生长指标表明，肠爽™20组显著提高了鲤鱼的生长性能（p<0.05）。王斌(1996) 用益生菌进行鲤鱼饲喂试验,发现试验组的鲤鱼生长明显好于对照组,其增重率提高了31.71% 。刘克琳等（2000）报道，芽孢杆菌类微生物添加剂对鲤鱼有促生长作用，能提高增重11.8%，饵料系数降低0.24。Kumar（2006）报道鲤鱼饲料中添加枯草芽孢杆菌增重率比对照组提高了6.86%-15.57%；成活率比对照组高50%-69%，显著提高了鲤鱼的生长性能。这与本试验的试验结果相一致。肠爽™20枯草芽孢杆菌来自健康鲤鱼肠道，具有特异性强、活力高、繁殖力快的特点，其进入肠道后，能够迅速适应动物肠道环境并生长增殖，同时分泌多种酶类，提高宿主肠道消化酶活性，促进对营养物质的消化吸收，提高鲤鱼生长性能。
　　6.2　肠爽™20对鲤鱼的抗病力效果
刘克琳等（2000）报道，芽孢杆菌类微生物添加剂能促进鲤鱼免疫器官内T、B淋巴细胞成熟、数量增多，提高鲤鱼的免疫力和抗病力。嗜水气单胞菌是鲤鱼出血病的主要致病菌，本试验结果表明，肠爽™20能够显著提高鲤鱼的抗病力。其原因可能是肠爽™20进入宿主肠道后，枯草芽孢杆菌通过营造厌氧环境、和有害菌竞争附着位点及营养物质、产生诸如脂肽类、蛋白类等抑菌物质来抑制有害菌的生长，从而保证有益菌在宿主的优势地位，提高宿主抗病力。
　　7、结论
  本次试验表明，肠爽™20添加到鲤鱼饲料中，能够起到提高鲤鱼生长性能和抗病力的效果，可以替代抗生素作为绿色饲料添加剂在饲料中使用。