近年来，随着人们对环境保护和食品安全的重视，及生物技术突飞猛进的发展，以益生菌作为饲料添加剂替代抗生素和化学药物成为国内外学者研究的热点。益生菌作为饲料添加剂在畜禽饲料中的应用报道较多，且应用效果明显（Stahly et al., 1994）。在水产养殖中，益生菌有两种应用方式，一是直接泼洒到水体中，主要起分解池底有机物、降低水体氨氮含量、维持水体菌相和藻相平衡等调节水质的作用，这种方式应用较多；二是添加到饲料中，但由于水产饲料加工温度较高，多数有益菌不能耐受，以及水产动物消化道较短且环境不稳定，有益菌不易定植等原因，导致水产饲料中有益菌的添加效果不稳定。
        肠爽™是结合水产动物生理特点，依据“同源筛分”原则，从健康鲤鱼肠道中定向选育出的枯草芽孢杆菌，配伍3种植物提取物，经代表国际先进水平的发酵工艺-合生发酵开发而成的新型益生菌类肠道调节剂。本实验的目的是研究肠爽™20添加到饲料中对罗非鱼生长性能和饲料效率的影响。
　　2、材料与方法
　　2.1　实验饲料
        以鱼粉、豆粕和菜籽粕等为主要蛋白源，鱼油和豆油为脂肪源，小麦面粉为主要糖源，并补充无机盐、维生素等配制出基础饲料。在基础饲料中分别添加0、0.05%、0.1%和0.15%的肠爽™20，另外，以菜籽粕和棉籽粕替代豆粕配制低豆粕饲料，并向饲料中分别添加0.1%和0.2%的肠爽™20（肠爽™20由北京都润科技有限公司提供的枯草芽孢杆菌，活菌数为20亿cfu/g），配制成6种等氮等能的饲料，饲料蛋白质含量约为30%，脂肪含量约为5%（饲料配方见表1）。在饲料制作过程中，饲料原料经粉碎并过40目筛，各原料按配比定量后混合均匀，然后加入适量的水揉匀，经双螺杆挤条机（华南理工大学研制的多功能催化合成机）加工成1.5×2.0mm的颗粒状饲料，并在40℃烘干至饲料水分含量为10%左右。
　　2.2　实验过程
        实验于集美大学生态实验室室内循环水养殖系统进行。正式实验前，罗非鱼放于水族箱（1000L）中暂养，并以实验对照组饲料饱食投喂，使之逐渐适应实验饲料。暂养1周后，对实验鱼饥饿24h，然后称重，并挑选出体格健壮、规格一致（2.7±0.2g）的罗非鱼进行分组实验。实验水族箱体积为120L，放养密度为20尾/箱，每种饲料随机投喂3组实验鱼。每天饱食投喂2次（08：00和17：30）。投喂期30天。实验期间水温控制在为29±0.5℃，溶解氧含量在5mg.L^-1以上。实验期间，每天清除残饵和粪便并记录摄食量和鱼健康状况。实验结束时，对实验鱼饥饿24h，以丁香油（1:10000）麻醉，然后计数，称重。
　　3、统计分析
        采用SPSS 11.5 for Windows对所得数据进行方差分析，若差异达显著，则进行Tukey多重比较，显著性水平为P<0.05。
　　4、结果
        饲料中添加显著影响罗非鱼的增重率（P<0.05）（见表2）。饲料中添加0.05%的肠爽™20组，罗非鱼增重率（309.4%）有高于对照组（283.5%）的趋势，但差异不显著；而0.1%肠爽™20添加组的罗非鱼增重率（328.6%）显著高于对照组。杂粕替代豆粕后添加肠爽™20组罗非鱼的增重率与对照组差异不显著，且0.1%肠爽™20添加组的增重率高于0.2%肠爽™20添加组和对照组。以上结果表明，添加肠爽™20可以提高罗非鱼的生长率，促进罗非鱼对营养物质的消化吸收。因此，根据以上结果，建议罗非鱼饲料中肠爽™20的添加量为0.05-0.1%。
饲料中添加肠爽™20组罗非鱼饲料系数低于对照组，但其差异未达显著水平，其中添加肠爽™20的高豆粕组饲料系数比对照组平均降低7.5%，添加肠爽™20的低豆粕组比对照组平均降低4.9%。
　　5、讨论
        本实验的结果表明，饲料中添加肠爽™20能显著提高罗非鱼的生长性能，并能够降低饲料系数，这说明肠爽™20可提高动物对饲料营养物质的利用率。易力和汪洋（2006）发现饲料中添加益生菌与对照组相比可使鲤鱼生长提高10.6%。温俊（2009）发现，草鱼饲料中添加肠爽™20可显著降低草鱼肠道弧菌总数，提高有益枯草芽孢杆菌总数，并且可提高草鱼的生长性能，说明肠爽™20中的枯草芽孢杆菌可以很好地在草鱼肠道定植。冯俊荣等（2005）研究了饲料里添加乳酸菌和芽孢杆菌对牙鲆蛋白酶和生长的影响，6周生长实验后，添加益生菌的实验组比对照组体重增加26.86%，并且肠道蛋白酶和脂肪酶（冯俊荣等，2008）活性也显著高于对照组，相似的结果也在刘小刚等（2002）在异育银鲫的研究中发现。王福强等（2005）研究认为，益生菌能够拮抗牙鲆肠道弧菌的生长，增加消化道消化酶的活力，促进肠道有益菌的生长繁殖，并能够提高牙鲆的生长率。因此，推断肠爽™20促进罗非鱼生长，降低饲料系数的机理是枯草芽孢杆菌在肠道定植后调节微生态环境，维护肠道健康，同时肠道益生菌分泌消化酶，提高对饲料的消化率从而提高罗非鱼对饲料的利用率并促进生长。
        肠爽™20中枯草芽孢杆菌的是从鱼类肠道中筛选出的菌种，因而易于在鱼类肠道中定植，同时芽孢杆菌成熟期以孢子形式存在，能耐受饲料加工和制粒过程的条件，以及消化道中酸和胆盐的作用，从而保证更多有活力的芽孢杆菌进入到鱼类肠道，枯草芽孢杆菌可产生乳酸、挥发性脂肪酸及蛋白多肽类拮抗物质，降低肠道pH值，从而抑制大肠杆菌等有害微生物的繁殖；健康的肠道微生态环境不仅有利于营养物质的吸收，而且各种有益菌分泌的大量消化酶促进了动物对饲料的消化，因此，肠爽™20可以提高鱼类对饲料的利用率并能促进生长。
        豆粕是一种优质的饲料蛋白原料，广泛应用于动物饲料的生产中。但近年来豆粕价格高涨，寻求替代豆粕的技术成为饲料行业必须面对的难题。本试验中，以棉籽粕和菜籽粕替代豆粕以降低饲料配方成本，添加肠爽™20后替代组罗非鱼增重率和饲料系数与对照组没有显著差异，其中添加0.1%肠爽™20的替代组增重率（295%）高于对照组（283%），而饲料系数低于对照组，按照当时的原料价格计算（豆粕：3480元/吨；菜籽粕：2050元/吨；棉籽粕：2550元/吨），对照组饲料配方成本为2855元/吨，而杂粕替代豆粕组饲料配方成本为2730/吨，可节约饲料成本125元/吨，因此添加肠爽™20可以在不影响养殖效果的情况下降低饲料成本。

 参考文献
Stahly T S., Williams N H., Zimmerman D R. Impact of carbide on rate, efficiency and composition of growth in pigs with a low and high level of immune system activation[J]．J Animal Sci, 1994, 72: 165-174.
冯俊荣，陈营，杜荣斌，傅学军. 微生态制剂对牙鲆幼鱼蛋白酶和生长的影响. 粮食与饲料工业. 2005，12，36-38.
冯俊荣，陈营，李秉钧. 微生态制剂对牙鲆幼鱼脂肪酶的影响. 水产科学. 2008， 27，64-66.
刘小刚，周洪琪，华雪铭，等. 微生态制剂对异育银鲫消化酶活性的影响. 水产学报. 2002，26，449-452.
王福强，李坤，邵占涛,等. 产蛋白酶益生菌Y2-2和Y1-13对牙鲆幼鱼生长促进作用的研究. 海洋科学. 2005，29，29-33.
温俊. 肠爽™对草鱼肠道菌群及生长性能的影响. 饲料研究. 2005，62-63.
易力，汪洋. 不同益生菌剂对鲤鱼促生长作用研究. 水利渔业. 2006，26，86-87. 

表1实验饲料配方及营养组成 

表2 饲料中添加肠爽™20对罗非鱼生长、成活和饲料系数的影响1

¹每行数据上标字母无重复者表示显著性差异（P<0.05）；²ANOVA表示单因素方差分析。